对虾杆状病毒PCR检测试剂盒规格

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

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实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
TCPA2-溴-4-甲基吡啶 97%氯乙酰胺 99%

2-Methylbenzothiazole3-丁基吡啶 98%1,5-二羟基萘 98%

5-Nitrobenzimidazole1,2-双(*基硅氧基)乙烷 95%二 99%

Beryllon I3-溴基叔丁基二甲基硅  97%1,5-萘二磺酸，四 97%

Beryllon II2-(3-溴基)四氢-2H-吡喃 97%2,7-萘二磺酸钠 CP

Graphite powder(S,S)-(+)-N,N′-双(3,5-二-叔丁基亚杨基)-1,2-环已二胺 98%1，5-萘二磺酸钠 98%

Permutit(R,R)-(−)-N,N′-双(3,5-二叔丁基亚杨基)-1,2-环已二胺 氟酸铵 97%

Soda lime3-羧基苯酸 99%氟酸铵 99.5% metals basis

Sea sand三苯基氯硅烷 95%氟酸铵 99.99% metals basis

Lipofectamine 2000 Transfection Reagent3-氯过氧苯甲酸 75%氟酸铵 99.995% metals basis

Cinchonine3-氯过氧苯甲酸 85%氟酸铜 45%溶液

Rhodanine2-氯-5-硝基吡啶 99%氟酸铅 50%溶液

Diethyl oxalate4-基苯酸 97%氟酸 AR,99.0%

Iodine4-羟基苯酸 97%氟酸钠 AR,99.0%

Chinese red2-基-6-甲基吡啶 97%氟酸亚锡 50% w/w溶液

Bentonite2-氯-3-吡啶甲 97%氟酸钠 99.99% metals basis

3-氨基-4-羟基苯甲酸(>97.0%(HPLC)(T))ACSL1 AntibodyInhibin beta A/Activin A  抑制素βA抗体 Inhibin βA

反-2-[3-(4-叔丁基苯基)-2-甲基-2-亚烯基]二(>98.0%(HPLC)(N))M-Cadherin (D4B9L) Rabbit mAbInhibin Alpha  抑制素α抗体 Inhibin α

α-基-4-羟基肉桂酸(>98.0%(HPLC)(T))M-Cadherin (D4B9L) Rabbit mAbING1/p33  生长抑制因子基因1抗体

3,5-二甲氧基-4-羟基肉桂酸(>99.0%(GC)(T))THEX1 AntibodyInfluenza A virus (Duck)  鸭流感病毒抗体

2,5-二羟基苯甲酸(>99.0%(GC)(T))Tris-Glycine SDS Running Buffer (10X) INCA1  INCA1蛋白抗体

4'-羟基偶氮苯-2-羧酸(>98.0%(HPLC)(T))Phospho-Akt (Ser473) (587F11) Mouse mAbImportin4/RanBP4  核蛋白4抗体（Ran结合蛋白4）

3-羟基-2-吡啶甲酸(>98.0%(T))Phospho-Akt (Ser473) (587F11) Mouse mAbImportin 9/RanBP9  核蛋白9抗体（Ran结合蛋白M）

4'-羟基苯偶氮基-4-羧酸合物(>98.0%(HPLC)(T))THEX1 (D2B4) Rabbit mAbIMPDH2  5'肌苷磷酸脱氢酶2抗体

3-吲哚烯酸(>98.0%(HPLC)(T))PKM2 (D78A4) XP® Rabbit mAbIMPDH1  肌苷单磷酸脱氢酶1抗体

2',4',6'-三羟基苯乙酮一合物(>98.0%(GC))PKM2 (D78A4) XP® Rabbit mAbIMPAD1  肌单磷酸酶IMPA3抗体
对虾杆状病毒PCR检测试剂盒规格雌激素硫酸转移酶抗体2-Acetyl-3-ethylpyrazine中文名：2-乙酰基-3-乙基吡嗪别名：分子式：C8H10N2O

E Tag标签抗体2-Ami-6-ethoxybenzothiazole中文名：2-氨基-6-乙氧基苯并噻唑别名：分子式：C9H10N2OS

内皮细胞受体蛋白酪氨酸激酶抗体N-Acetyl-L-tryptophan中文名：N-乙酰-L-色氨酸别名：分子式：C13H14N2O3

酪氨酸蛋白激酶受体B2抗体L-Carsine中文名：L-肌肽别名：分子式：C9H14N4O3

转录因子E2F-2抗体N-Acetyl-D-tryptophan中文名：N-乙酰基-D-色氨酸别名：分子式：C13H14N2O3