白色念珠菌PCR检测试剂盒规格

注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
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实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。
2-Ethylhexaic acidZ-L-酪氨酸甲酯  98.5%吐温60 CP

IPC-PFFA-8 HGN-CBZ-L-丝氨酸 98%吐温60 LR

Sodium chlorideZ-Ser(Tos)-OMe 98.5%环氧烷  99%

Potassium chlorideZ-O-叔丁基-D-丝氨酸  98.5%2,2'-联喹啉 98%

Magnesium chloride hexahydrateZ-D-Tyt(tBu)-OH•DCHA 98.5%2--1-,(正+反) 95%

Magnesium chlorideN-苄氧羰基-O-叔丁基-L-酪氨酸二环己胺盐  98.5%硫代乙酸乙酯 98%

Calcium chloride dihydrateZ-Trp(Boc)-OH•DCHA 98%乙酸异酯 99%

Calcium chloride anhydrousZ-L-亮氨酸DCHA   98.5%3-甲氧基丁基乙酸酯 99%

Cobalt chloride hexahydrateN-苄氧羰基-L-天门冬氨酸 4-叔丁酯  99%过硫酸铵 99.99% metals basis

Cobalt(Ⅱ) ChlorideN-苄氧羰基-N'-(4-甲氧基-2,3,6-三磺酰基)-L-精氨酸环己胺过硫酸铵 AR，98.5%

Lithium chloride mohydrateCbz-3-(2-萘基)-D-氨酸 98%过硫酸铵 ACS, ≥98.0%

Lithium chlorideN-苄氧羰基-N-甲基-L-苯氨酸 98%过硫酸铵 电泳级, ≥98%

Alumium chloride hexahydrate2-基-4-胺  97%过硫酸铵 分子生物学级, ≥98%

Aluminum chloride anhydrous4-溴苯乙酮 98%过硫酸钠 AR,99%

Cadmium chloride对氯苯甲 98%过硫酸钠 99.99% metals basis

Cuprous chloride邻氯苯甲 98%(±)-2-氨基-1-丁 97%

邻苯二甲酸二环己酯(标准品)HIF-1α (D1S7W) XP® Rabbit mAbMaltose Binding Protein/MBP  麦芽糖结合蛋白抗体

4,4'-二氨基二苯(标准品)Phospho-Tuberin/TSC2 (Ser1254) AntibodyMALT1  粘膜相关淋巴组织淋巴瘤转运蛋白1抗体

邻苯二甲酸二壬酯(标准品)Phospho-Tuberin/TSC2 (Thr1462) (5B12) Rabbit mAbMAL/MPV17  T淋巴细胞成熟相关蛋白抗体

邻苯二甲酸二正戊酯(标准品)Phospho-Tuberin/TSC2 (Thr1462) (5B12) Rabbit mAbMAL  T淋巴细胞成熟相关蛋白抗体

邻苯二甲酸二丁酯(标准品)CDC37 (V297) AntibodyMAL  MAL蛋白抗体

邻苯二甲酸二丁酯标准溶液(200ug/ml,基体：甲)MCM2 (D7G11) XP® Rabbit mAbMAGP2  纤微丝相关糖蛋白2抗体

2,4-二氨苯(分析标准品,>99%)MCM2 (D7G11) XP® Rabbit mAbMAGEL2  黑色素瘤抗原样基因2抗体

3,3'-二甲氧基联苯胺(标准品)Presenilin 1 AntibodyMAGEG1/HCA4/NDNL2  黑色素瘤相关抗原G1抗体（肝癌相关蛋白4）

2，4-二氯酚标准溶液(1.00mg/ml,基体：甲)PSD95 (7E3) Mouse mAbMAGEF1  黑色素瘤抗原F蛋白家族1抗体

2,6-二氯苯酚(标准品)β-Tubulin (9F3) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)MAGEE1/MAGEC2  黑色素瘤相关抗原C2抗体
白色念珠菌PCR检测试剂盒规格裸鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA试剂盒英文名称：Nude Mouse Protein Phosphatase,PP ELISA Kit *

裸鼠环加氧酶2(COX-2)ELISA试剂盒英文名称：Nude mouse cyclooxygenase-2,COX-2 ELISA Kit*

裸鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒 英文名称：Nude mouse Alpha-fetoprotein,AFP ELISA Kit 进口/分装

裸鼠克拉拉细胞蛋白(CC16) ELISA试剂盒英文名称：Nude Mouse Clara cell protein,CC16 ELISA Kit 进口/原装

骆驼β内啡肽(β-EP)ELISA试剂盒英文名称：Camel Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit进口/原装

骆驼内皮素1(ET-1)ELISA试剂盒英文名称：Camel Endothelin 1,ET-1 ELISA Kit *小鼠神经特异性烯醇化酶(NSE)ELISA试剂盒      组装/原装

小鼠神经肽Y(NP-Y)ELISA试剂盒      组装/原装

小鼠神经生长因子(NGF)ELISA试剂盒      组装/原装

小鼠神经生长导向因子(Slit2)ELISA试剂盒      组装/原装         
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。