带绦虫通用PCR检测试剂盒价格上海联祖生物相关产品:ANNA-1/Hu检测试剂盒 为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。浓洗涤液:用580mL蒸馏水或去离子水将20mL浓洗涤液稀释至600mL,进行30倍稀释。
产品分类
PRODUCT CLASSIFICATION相关文章
RELATED ARTICLES
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
产品名称 | 带绦虫通用PCR检测试剂盒价格 |
英文名称 | Taenia spp.PCR |
货号 | LZP7365 |
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
2,6-Dimethyl-3,7-octadiene-2,6-diol3-戊酮 for HPLC,≥98% (GC)3,4-二羟基苯甲 分析标准品,≥99%
2,6-Dimethyl-7-octene-2,3,6-triol3-戊酮 分析标准品,用于环境分析,≥99.5% (GC)丹皮酚 99%
2-Caren-10-ol3-戊 99%丹皮酚 分析标准品
2-Hydroxy-1,8-cineole2,2,4-*基-1,3-戊二单异丁酸酯 97%大麦芽碱 分析标准品,≥99%
4-Hydroxy-2,6,6-trimethyl-1-cyclohexenecarboxylic acid甲基壬酮 分析标准品苯酞 99%
5-Isopropyl-2-methylphel甲基壬酮 99%盐酸苏碱 分析标准品
6-Hydroxy-2,6-dimethyl-2,7-octadieic acid甲基壬酮 GCS,≥99.5% (GC)盐酸苏碱 98%
6’-O-Galloyl paeoniflorin甲基壬酮 ≥98%, FCC, Kosher, FG噻吩-2,5-二羧酸 98%
10-Hydroxy-2-deceic acid茜素黄R AR苯甲 AR,>98.5%(GC)
Albiflorin碱蓝6B IND2-叔丁基苯酚 99%
Anemonine天青Ⅱ AR2,4-二叔丁基酚 97%
Benzoyloxypeoniflorin4-氨基-3-肼基-5-巯基-1,2,4-三唑(用于的测定) AR,95%2,6-二叔丁基酚 98%
Benzoylpaeoniflorin4-氨基-3-肼基-5-巯基-1,2,5-三唑(用于的测定) 99%2,4,6-三叔丁基酚 99%
Betulalbuside A氧化铝G TLC溴化铵 AR,99.0%
Biondinin C铝试剂 AR溴化铵 ACS
Borneol铝试剂 ACS溴化铵 99.99% metals basis
十七碳酸(98%)DDX3 AntibodyPHAPI2/APRIL 酸性核磷蛋白32家族B抗体
隐色孔雀石绿(标准品)Radixin (C4G7) Rabbit mAbPHAP1 蛋白磷酸酶2A抑制剂1抗体
二十酸甲酯(标准品)Contactin-2 (D4M7G) Rabbit mAbPH-4/P4H-TM 脯氨酸解酶4抗体
蓖麻油酸甲酯(标准品)BTAF1 AntibodyPGT/Slco2a1 溶质载体蛋白家族21成员2抗体
甲酸甲酯(标准品)VEGF Receptor 3 (C28G5) Rabbit mAbPGRPS 肽聚糖识别蛋白1抗体
亚硫酸氢钠甲萘醌(标准品)Fibrillarin (C13C3) Rabbit mAbPGRN/Granulin 颗粒蛋白前体抗体
山嵛酸甲酯(标准品)Fibrillarin (C13C3) Rabbit mAbPGRMC 孕激素受体膜相关元件抗体
己酸甲酯(标准品)Phospho-PRAS40 (Thr246) AntibodyPGLS 磷酸葡萄糖酸内酯酶抗体
二十四烷酸甲酯(标准品)Phospho-EGF Receptor (Tyr998) (C24A5) Rabbit mAbPGK1 磷酸激酶1抗体
芥酸甲酯(标准品)α-Synuclein AntibodyPGGT1β 香叶烯基转移酶1β抗体
带绦虫通用PCR检测试剂盒价格3,4-Difluorophel,99%通用试剂 5G
2-Bromo-5-fluorophel,97%通用试剂 5G
2,4-Difluorophel,99%通用试剂 5G
4-Bromo-2,6-difluorophel,97%通用试剂 1G
4-Fluoro-3-(trifluoromethyl)phel,98%通用试剂 1G
2-Chloro-5-(trifluoromethyl)phel,96%通用试剂 1G
3-Bromo-5-fluorophel,97%通用试剂 1G
2-Ami-4-bromophel,≥98.0%通用试剂 1G
4-Bromo-3,5-dimethylphel,99%通用试剂 5G
6-Bromo-2-naphthol,97%通用试剂 5G
2-Isopropoxyphel,97%通用试剂 1G
4-Phexyphel,99%通用试剂 5G
2,6-Difluorophel,98%通用试剂 5G
3-Fluorophel,98%通用试剂 5G
4-Ethylphel,≥98%通用试剂 25G