雷斯顿埃博拉病毒PCR检测试剂盒规格上海联祖生物相关产品:ADV-IgM检测试剂盒为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测
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1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
产品名称 | 雷斯顿埃博拉病毒PCR检测试剂盒规格 |
英文名称 | Reston Ebola Virus PCR |
货号 | LZP7224 |
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
Xanthan gum烯酰胺 AR,99.0%乙偶姻 分析标准品,单聚体
6-Azauridine己二酸二酰肼 98%乙偶姻 Natural,≥96%(GC), FCC
Piperazine正丁 AR,98.5%2,3-丁二酮 98%
8-Hydroxyquinaldine1,4-丁二 99%磷酸二氢锰 CP
Hydantoin二乙二丁 99%磷酸二氢锰 AR
Lalin二乙二丁 CP茜素绿 AR
Kieselguhr1,3-丁二 99%2,2'-联吡啶-4,4'-二甲酸 96%
Celite 5451,3-丁二 分析标准品磷酸二氢锰 AR
Acrylyl chloride1,3-丁二 98%焦磷酸 AR,99%
Diethyl malonate*基氯硅烷 Wacker quality, ≥99.0% (GC)焦磷酸 CP,98%
Diacetone alcohol二酮 ≥99.0%(GC)焦磷酸 电镀级
MMA正十二硫 98%2-乙烯吡啶 97%
GMA二乙二丁醋酸酯 98%靛蓝 CP,85%
TFEAN,N-二甲基乙酰胺 P,98.0% 靛蓝 AR,90%
CarrageenanN,N-二甲基乙胺 99.0%靛蓝 98%
I-Carrageenan IOTA TypeN,N-二甲基乙胺 CP,98.0% 靛蓝 分析标准品
齐墩果酸(高纯98%)Histone H4 (D2X4V) Rabbit mAb (ChIP Formulated)Polycystin 2 多囊肾蛋白2抗体
齐墩果酸(标准品)Syntaxin 5 AntibodyPolycystin 1 多囊肾蛋白1抗体
莽草酸PABP2 (D6F3Q) Rabbit mAbPOLA2 DNA聚合酶α2抗体
莽草酸(标准品)PABP2 (D6F3Q) Rabbit mAbPol II/RNA polymerase II RNA聚合酶II抗体
羊藿苷Bak (D4E4) Rabbit mAb (PE Conjugate)Pokemon 蒙蛋白抗体
羊藿苷(标准品)EAF2 (E1R8C) Rabbit mAbPodoplanin Protein/gp36 平足蛋白抗体(淋巴管内皮细胞蛋白)
利奥西呱,BAY 63-2521MUC1 (D9O8K) XP® Rabbit mAbPodoplanin Protein/gp36 平足蛋白抗体(淋巴管内皮细胞蛋白)
马来酸非尼拉敏MUC1 (D9O8K) XP® Rabbit mAbPOC5 细胞中心粒蛋白抗体
DANSYL-GCVLSHMGB2 (D1P9V) Rabbit mAbPNPT1 多核苷酸磷酸化酶蛋白抗体
利那洛肽HMGB2 (D1P9V) Rabbit mAbPNPO 磷酸吡哆氧化酶抗体
雷斯顿埃博拉病毒PCR检测试剂盒规格人转录因子抗体-1(ATF-1)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:2~8℃1KU
人转铁蛋白受体(TFR/CD71)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:保存:-20℃1KU
人转移因子(TF)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:2~8℃1KU
人桩蛋白(Pax)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:RT,避光5克
人总胆汁酸(TBA)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:RT,避光5克
人总蛋白S(TPS)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:15KU
人总前列腺特异抗原(tPSA)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:15KU
人足细胞标记蛋白/足盂蛋白(PCX)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:保存:-20℃7.5KU