梭形血吸虫PCR检测试剂盒规格上海联祖生物相关产品:PEA检测试剂盒特异性:常用交叉反应率表示。含有与待测物相近结构部份的物质可能存在交叉反应,使测定结果升高,可能导致假阳性,所以交叉反应是评价其质量的关键指标。精密度:ELISA试剂一般指其批内CV%,其值应小于15%;定量试剂应同时考察线性范围。
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注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。
产品名称 | 梭形血吸虫PCR检测试剂盒规格 |
英文名称 | Schistosoma spindalePCR |
货号 | LZP7284 |
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
Polygalacic acid结晶氯化锂 AR,97.0%结晶皿 180mm
Polygalasaponin F无化锂 99%结晶皿 150mm
Polygalasaponin V无化锂 99.9% metals basis结晶皿 125mm
Polygalasaponin XXXI四氟酸锂 98%电加热圈(拔插式) 9cm
Polygalic acid四氟酸锂 99.9% metals basis电加热圈(拔插式) 11cm
Polyporenic acid C无高氯酸锂 99.9% metals basis电子节能控温仪 ZNHW-Ⅰ型
Pomolic acid 28-O-beta-D-glucopyrasyl ester无高氯酸锂 99.99% metals basis直型冷凝管 200/24#,24#
Pomolic acid硫酸锂 99.99% metals basis直型冷凝管 300/24#,24#
Poricoic acid A(F)硫酸锂 ACS, 99.0%4-溴-1- 96%
Prosapogenin CP4硫酸锂 AR, 99.0% 5-溴戊酸 97%
Pre-schisanartanin B高氯酸锂 三合物 AR,99%溴乙酸叔丁酯 98%
Pristimerin无氯化锂 ACS reagent, ≥99%3-溴-1- 97%
Prosapogenin CP6无化锂 99.999% metals basis2-溴吡啶 98%
20(R)-Protopanaxatriol无化锂 99.99% metals basis 1-溴-4-氯丁烷 98%
(20S)-Protopanaxdiol高氯酸锂 无, 98%1-溴-5-氯戊烷 97%
(20R)-Protopanaxdiol异铝 CP,97%2-溴戊烷 99%
邻苯二甲酸酐(>98%.BC)Phospho-STING (Ser366) (D7C3S) Rabbit mAbPhospho-MYL(Ser19) 磷酸化肌球蛋白轻链2抗体
结晶碳酸(>98%,BR)CD27 (O323) Mouse mAb (APC-Cy7® Conjugate)phospho-MYF5 (phospho Ser49) 磷酸化生肌决定因子Myf5抗体
焦磷酸(>97%,BC)n-phospho (Active) β-Catenin (Ser45) (D2U8Y) XP® Rabbit mAbPhospho-mu Opioid Receptor (Ser375) 磷酸化µ-型阿片受体抗体
钨酸二(>98%,BR)n-phospho (Active) β-Catenin (Ser45) (D2U8Y) XP® Rabbit mAbPhospho-mTOR (Tyr144) 磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗体
对甲苯磺酰氯(>98%,BR)Autophagy Vesicle Elongation (LC3 Conjugation) Antibody Sampler KitPhospho-mTOR (Thr2446) 磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗体
硫酸奎宁合物(>98%,BR)CD3 (UCHT1) Mouse mAb (APC Conjugate)Phospho-mTOR (Ser2481) 磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗体
溴酸钠(> 98%,BC)MUC1 (D9O8K) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)Phospho-Mst2(Thr180) 磷酸化蛋白激酶MST2抗体
次氯酸钠溶液BAFF (D7I1U) Rabbit mAbphospho-MST1R(Tyr1353) 磷酸化原癌基因c-Met相关酪氨酸激酶抗体
磷酸氢二钠十二(>98%,BR)Fra2 (D2F1E) Rabbit mAbphospho-MST1R(Tyr1238) 磷酸化原癌基因c-Met相关酪氨酸激酶抗体
磷钨酸钠(>98%,BC)AsCpf1 (Strain <i>BV3L6</i>) (E1U7C) Rabbit mAbphospho-MST1R(Ser1349) 磷酸化原癌基因c-Met相关酪氨酸激酶抗体
梭形血吸虫PCR检测试剂盒规格小鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:RT,避光10克
小鼠甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:1公斤
小鼠甲状腺过氧化物酶(TPO)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:1克
小鼠甲状腺球蛋白(TG)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:2~8℃1克
小鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:RT10克
小鼠甲状腺素抗体(TAb)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:500克
小鼠碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:10毫升
小鼠降钙素(CT)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:RT1米