不明血吸虫PCR检测试剂盒规格

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注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
Micraic acid A(5-羧基戊基)三苯基溴化磷  98%对甲 98%

Mogroside V氯己定 分析标准品，99.5%一次性注射器 10ml

Mogroside II-A24-基苄氯 98%塑料尖底离心管 1.5ml

Mogroside IIe氯己定 98%电加热套 1000ml

Mogroside III-A13,5-二甲酰氯 97%电加热套 500ml

Mogroside III2,5-二氯苯甲酸 97%电加热套 250ml

Mogroside IVa2,3-二甲酸 98%防溅球(缓冲球) 100/29,24

Mogroside IV2,4-二甲酸 98%三路真空接受管  24,24*3

Mogroside IVe2,2-二甲基丁酸 98%刺形分馏头 14.14 24.24

Mogroside VI2,5-二甲酸 98%蒸馏头75度14,24,24

Momordicine I2,4-二氯-5-磺酰胺基苯甲酸 98%塑料勺/木勺 硬质,中号

Momordicoside F13,5-二氨基苯甲酸 98%调药棒（玻璃棒）330mm

Momordicoside G3,5-二硝基杨酸 98%烧杯 500ml

Momordicoside I aglycone3-基苯甲 99%烧杯1000ml

Momordicoside K4-基苯甲 98%烧杯2000ml

Momordicoside L对氟苯甲酸乙酯 99%淀粉化试纸

盐酸苯胺(>99%,BR)Acetyl-α-Tubulin (Lys40) (D20G3) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)phospho-NFKBIA(Tyr305)  磷酸化IKB alpha抗体

联苯胺(>98%，BR)Phospho-SMAD2 (Ser465/Ser467) (E8F3R) Rabbit mAbphospho-NFKBIA(Ser32/36)  磷酸化IKB alpha(Ser32/36)抗体

Big CHAP(>98%，BR)Phospho-SMAD2 (Ser465/Ser467) (E8F3R) Rabbit mAbPhospho-NFKBIA (Tyr42)   磷酸化IKB α抗体

C12E8 10%溶液Nav1.1 (D8X1Y) Rabbit mAbPhospho-NFKB2(Ser866+Ser870)  细胞核因子/k基因结合核因子p100抗体

氟化钙(>98%,BR)HSL (D6W5S) XP® Rabbit mAbPhospho-NFKB1(Thr932)  磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体

硬脂酸钙HSL (D6W5S) XP® Rabbit mAbPhospho-NFKB1(Ser933)  磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体

咔唑(>95%,BR)Liprin β1 AntibodyPhospho-NFKB1(Ser907)  磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体

香柏油Ghost Dye™ Red 780 Viability DyePhospho-NFKB1(Ser903)  磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体

硝酸铈六TRAF4 (D1N3A) Rabbit mAbPhospho-NFKB1(Ser893)  磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体

硫酸铈八(>97%,BR)Syntaxin 1A (D4E2W) Rabbit mAbPhospho-NFKB1(Ser338)  磷酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体
不明血吸虫PCR检测试剂盒规格小鼠骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：1公斤

小鼠骨胶原交联(Cr)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：RT，避光25克

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小鼠骨退化特异标志物(CTX-2)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：RT，避光100克

小鼠骨形成蛋白(BMPs)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：RT，避光10克

小鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：1公斤

小鼠骨粘连蛋白(ON)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：100克