都柏林沙门氏菌PCR检测试剂盒规格

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注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
2’,3’-DehydrosalanlD-氨酸 98%肼黄 85%

2,3-Dihydroxy-12-oleanen-28-oic acidD-天冬酰胺,一 99%柯衣定 AR

2,3-Di-O-methylthiomethyleuscaphic acidD-谷氨酸 98%香紫苏内酯 97%

2,3-O-Isopropylidenyl euscaphic acidD-哌啶酸  99%S-联萘酚 99%

2,24-Dihydroxyursolic acidL-高脯氨酸 98%双(二苯基膦) 98%

2-Epitormentic acidD-脯氨酸 99%1,2-双(二苯基膦)乙烷  98%

2alpha-hydroxy-3beta-acetyloxy-betulic acidD-缬氨酸 98%1,1'-双(二-叔丁基膦基)二茂铁 98%

2’’-O-acetyl-platyconic acid A对溴苯酚 98%1,5-双(二苯基膦)戊烷  97%

2-Oxopomolic acid对溴苯酚 分析标准品1,6-双(二苯基膦基)己烷  97%

2-Picenecarboxylic acid溴乙 97%1,1'-双(二苯基膦)二茂铁 97%

3,4-Secocucurbita-4,24-diene-3,26,29-trioic acidN-溴代丁二酰亚胺 AR,99.00%双(三苯基膦)氯化铵 96%

3,4-Secotirucalla-4(28,7,24-triene-3),26-dioic acidN-溴代丁二酰亚胺 CP,98.5%1,4-双(二苯膦基)丁烷 96%

3,6,19,23-Tetrahydroxy-12-ursen-28-oic acid3,5-二氯-2-羟基苯磺酸钠 99%(R)-(+)-2,2'-双(二苯膦基)-1,1'-联萘 98%

3,6,19-Trihydroxy-23-oxo-12-ursen-28-oic acidN-羟基琥珀酰亚胺 98%R-1,1'-联-2-萘酚 99%

3,19-Dihydroxy-6,23-dioxo-12-ursen-28-oic acidN-代丁二酰亚胺 97%(S)-(-)-2,2'-双(二苯膦基)-1,1'-联萘 98%

3,21-Dihydroxy-14-serraten-16-one喹啉 AR,96%1,3-双(二苯膦基)烷 97%

磷酸二氢钠一(ACS级)MKL1/MRTF-A AntibodyPhospho-SEK1/MKK4 (Ser257)  磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶4抗体

葡萄糖酸钙PRMT7 (D1K6R) Rabbit mAbphospho-SCNN1B(Thr615)  磷酸化上皮钠通道β2抗体

乙二胺四乙酸四钠盐二LARP1 Antibodyphospho-SCNN1B(Ser633)   磷酸化上皮钠通道β2抗体

十二烷基-β-D-麦芽糖苷;月桂酰基麦芽糖苷Vti1a (D8U3M) Rabbit mAbPhospho-SATB1 (Ser47)  磷酸化核基质结合区结合蛋白1抗体

盐酸氨基脲Phospho-Mcl-1 (Thr163) (D5M9D) Rabbit mAbPhospho-S6 Ribosomal Protein (Ser240/244)  磷酸化S6核糖体蛋白抗体

硫酸链霉素灭菌溶液，30 mg/mlxa (D8L7U) Rabbit mAbPhospho-S6 Ribosomal Protein (Ser235+Ser236)  磷酸化S6核糖体蛋白抗体

乙酰胺XPC (D1M5Y) Rabbit mAbphospho-RUNX3(Ser338)  磷酸化Runx3抗体

1,3-双(三羟甲基)甲基氨基烷IFIT1 (D2X9Z) Rabbit mAbphospho-RUNX2(Ser451)  磷酸化成骨特异性转录因子抗体

萘乙酰胺(AR)Phospho-SLP-76 (Tyr145) Antibodyphospho-RUNX1(Ser266)  磷酸化急性髓细胞白血病1蛋白抗体

氢氧化钡八CEACAM1 (D1P4T) Rabbit mAbphosphor-SMAD2(Ser425)  磷酸化细胞信号转导分子SMAD2抗体
都柏林沙门氏菌PCR检测试剂盒规格鼠γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：5克

鼠白介素12(IL-12/P70)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：2～8℃5克

鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：2～8℃150毫升

鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：2～8℃150毫升

鼠白介素6(IL-6)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：2～8℃150毫升

鼠白三烯B4(LTB4)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：100毫克

鼠白三烯D4(LTD4)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：100克

鼠表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：RT25克