无绿藻通用PCR检测试剂盒厂家

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

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实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
Ammonium benzoate制霉菌素 ≥4,400 USP units/mg吡啶-3，4-二羧酸 98%

Ammonium citrate dibasic萘酚AS-D-乙酸酯 98%2,6-吡啶二甲 97%

Ammonium ferril citrate brown还原型辅酶I二钠盐 98%4-甲苯磺酰异酸酯 96%

Ammonium ferric oxalateβ-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸钠盐 97%（酶法)2-(三氯乙酰)吡咯 99%

Ammonium formateN-辛酰基-N-甲基葡糖胺 99%盐酸多巴胺 98%

Ammonium tartraten-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷 97%（±）-α-烟酸酚

TEBACn-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷 98%，用于蛋白分析反二酸 CP，99.0%

Ammonium alcohol polyvinyl phosphate吩硫酸甲酯 98%碳酸胍 99%

Ammonium hexachloroplatinate(IV)6-磷酸葡萄糖酸三钠盐 99%异抗坏血酸钠 98%

Urea hydrogen peroxide普卡酶素 BC三氧化二锑 SP

TED钌红 95%三氧化二锑 99.99% metals basis

TSC钌红 36%，电镜三氧化二锑 AR，99.5%

Hydroxylamine solution乙酸钠 98%三氧化二锑 99.9%，平均粒径：0.7 µm

TETN硫代甜菜碱 12 98%三氧化二锑 99.999% metals basis

Magnesium oxide十二烷基硫酸钠 97%，电泳三氧化二锑 CP，99%

Magnesium borate mohydrate十二烷基硫酸钠 99.0%，超纯级β-氨酸乙酯盐酸盐 98%

司他夫定SignalSilence® PTP1B siRNA IIRabbit Anti-chicken IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5标记的兔抗鸡IgG

司他夫定(标准品)Artemis (D7O8V) Rabbit mAbRabbit Anti-chicken IgG/PE-CY5  PE-CY5标记的兔抗鸡IgG

吗氯贝胺p130 Cas (E1L9G) Rabbit mAbRabbit Anti-chicken IgG/PE-Cy3  PE-Cy3标记的兔抗鸡IgG

吗氯贝胺(标准品)CYP3A4 (D9U6N) Rabbit mAbRabbit Anti-chicken IgG/PE  PE标记的兔抗鸡IgG

黄芪甲苷(标准品)UBE1L2/UBA6 AntibodyRabbit Anti-chicken IgG/HRP  辣根过氧化物酶标记的兔抗鸡IgG

黄芪甲苷TRIM33 (E1N2Z) Rabbit mAbRabbit Anti-chicken IgG/Gold  胶体金标记的兔抗鸡IgG

那格列奈（标准品）PGD AntibodyRabbit Anti-chicken IgG/FITC  FITC标记的兔抗鸡IgG

那格列奈ATP-Citrate Lyase (D1X6P) Rabbit mAbRabbit Anti-chicken IgG/Cy7  Cy7标记的兔抗鸡IgG

那格列奈PSMC5/TRIP1 AntibodyRabbit Anti-chicken IgG/Cy5.5  Cy5.5标记的兔抗鸡IgG

丁溴东莨菪碱  NUP98 (C39A3) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)Rabbit Anti-chicken IgG/Cy5  Cy5标记的兔抗鸡IgG
无绿藻通用PCR检测试剂盒厂家人心肌特异性肌钙蛋白T(c)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：25克

人心肌营养素1(CT-1)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：5克

人心纳素(ANF)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：RT10克

人心肽(ANP)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：RT，避光10克

人心型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：100克

人新生儿促甲状腺素(N-TSH)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：500克

人新生甲状腺素(NN-T4)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：10克

人性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：2～8℃1克