脊髓灰质炎病毒通用型PCR检测试剂盒规格

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

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实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
Di-n-octylamine酸性铬蓝K AR氯亚铂酸 AR

Diphenylamine偶氮荧光桃红 Biological stain醋酸钯 AR，Pd 46.0 - 48.0 %

Barium diphenylamine sulfonate偶氮荧光桃红 Dye content 90 %氧化钯 Pd ≥85%

N,N'-Diphenylbenzidine盐酸氨基脲 99%无氧化铂 铂含量≥85.4%

1,7-Diamiheptane盐酸氨基脲 分析标准品，99.95%硝酸铂溶液 Pt, 15%

Malonamide1-氨基-2-萘酚-4-磺酸 97%氯化钯  Pd 59-60%

N-Methylacetamide茜素络合指示剂 Indicator硝酸钯(II) 合物 Pd ≥39.0%

2'-Nitroacetanilide茜素 97%钯粉 99.9% metals basis，粒径0.5μm

4-Nitroacetanilide苯胺蓝，酸溶 Biological stain硫酸钯 Pd 51.2%-53.9%

3-Ami-1-propal茜素绿 AR硫酸钯，二  Pd ≥44%

Isopropalamine苯胺蓝（溶） BS IND氯亚钯酸 Pd ≥32.6%

Salicylanilide偶氮胭脂红G Biological stain氧化铂化物 AR,99.95%

Succinimide茜素绿 Dye content 95%钯碳酸钙 钯含量, 5.0%

Sulfanilamide灿烂绿 高纯级,95%超细铂粉 99.9%,平均粒度:0.1-0.5μm

Triisoamylamine铋试剂Ⅰ 97%四氯化铂 铂含量，58%

Trimethylamine hydrochloride铋试剂II CP海绵铂 99.95%

咖啡酸(进口标准品)Rab11FIP1 (D9D8P) Rabbit mAbRabbit Anti-Mink IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647标记的兔抗貂IgG

硫酸新霉素PathScan® Total Androgen Receptor Sandwich ELISA KitRabbit Anti-Mink IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555标记的兔抗貂IgG

硫酸新霉素(标准品)β2-microglobulin (D8P1H) Rabbit mAbRabbit Anti-Mink IgG/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的兔抗貂IgG

盐酸苯海拉明BAF Complex Antibody Sampler KitRabbit Anti-Mink IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350标记的兔抗貂IgG

盐酸苯海拉明(标准品)c-Myc (D84C12) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjugate)Rabbit Anti-Mink IgG  兔抗貂IgG

聚肌苷酸MRP4/ABCC4 (D1Z3W) Rabbit mAbRabbit anti-MG IgG/RBITC  罗丹明标记的兔抗长爪沙鼠IgG

米屈肼SMYD3 (D2Q4V) Rabbit mAbRabbit anti-MG IgG/PE-Cy7  PE-Cy7标记的兔抗长爪沙鼠IgG

米屈肼(标准品)Sin1 (D7G1A) Rabbit mAbRabbit anti-MG IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5标记的兔抗长爪沙鼠IgG

卡拉胶Prostatic Acid Phosphatase (D3Y5P) Rabbit mAbRabbit anti-MG IgG/PE-CY5  PE-CY5标记的兔抗长爪沙鼠IgG

普仑司特uPAR (D4Q5S) Rabbit mAbRabbit anti-MG IgG/PE-Cy3  PE-Cy3标记的兔抗长爪沙鼠IgG
脊髓灰质炎病毒通用型PCR检测试剂盒规格人沙眼衣原体(CT)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：25克

人沙眼衣原体抗体(CT)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：2～8℃，避光10克

人山梨醇脱酶(SDH)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：10克

人伤寒抗原(St-Ag)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：2～8℃1克

人上皮膜抗原(EMA)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：10克

人上皮特异性抗原(ESA)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：RT，避光25克

人上皮细胞粘附分子(Ep-CAM/CD362)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：1克

人上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：500克