同斑节对虾杆状病毒PCR检测试剂盒规格

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

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实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
4-Nitrophenyl α-D-manpyraside四溴钯酸 Pd ≥20.5%亚铁化钠 CP

ADPG铑粉 99.99% metals basis原甲酸*酯 98%

RuDP氧化铑，合 铑 55%原甲酸三乙酯 99%

Acarbose氯亚铂酸钠 Pt 44.5%氟化铵 AR，98%

Methyl β-D-glucopyraside四氯钯酸钠  98%氟化铵 GR，98%

D-(+)-Sorbose六氯代铂酸钠六合物 Pt 34.0%氟化氢铵 AR,98.5%       

Moacetone glucose氯金酸钠 金含量,48%  AR,40.0%

Kuromanin chloride硫酸铑溶液 80g（Rh）/L溶液氟酸 AR,40.0%

2-(Chloromethyl)-4-(4-nitrophenyl)-1,3-thiazole四氨合氯化铂 合物 98%氟酸 CP,40.0%

2-Deoxy-L-ribose四(三苯基膦)铂 Pt 15.2%氟酸 49.5-50.5%溶液

L-(−)-Glucose乙酸戊酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)氨基胍碳酸氢盐 98.5%

Chlorophyllin乙酸戊酯 AR,99.00%三氧化二锑 99.99% metals basis

Chlorophyll乙酸戊酯 CP,98.5% 三氧化二锑 AR，99.5%

Chlorophyll B茴香 98%重去甲肾上腺素 ≥98%(HPLC),USP

Chlorophyll A乙缩 CP,97%L-去甲肾上腺素 98%

Crystal violet乙缩 Standard for GC，>99%（GC)辛弗林 98%

纳他霉素(标准品)Drebrin A AntibodyRIAM/APBB1 interacting protein 1  β淀粉样蛋白前体结合蛋白B-1抗体

硝苯地平Di-Methyl-Histone H3 (Lys27) (D18C8) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)rHPV  重组人瘤病毒抗体

硝苯地平（标准品）TPX2 (D2R5C) XP® Rabbit mAbRHOBTB1  Rho相关结构域BTB蛋白质1抗体

尼莫地平Skp1 (D3J4N) Rabbit mAbRhoA  RhoA抗体

尼莫地平（标准品）Phospho-M-CSF Receptor (Tyr699) (D10B11) Rabbit mAbRho C  RhoC抗体

硝唑尼特CPT1A (D3B3) Rabbit mAbrhIL-18  重组人白细胞介素18抗体

硝唑尼特(标准品)Plectin-1 (D6A11) Rabbit mAbRHEB  Ras蛋白脑组织同源类似物RHEB蛋白抗体

寡霉素ALamin B2 (D8P3U) Rabbit mAbRHCG  RH血型C糖蛋白抗体

盐酸奥洛他定SignalSilence® c-Raf siRNA IRHCE  Rh血型C抗原抗体

盐酸奥洛他定(标准品)E2A (D2B1) Rabbit mAbRHBDD3  垂体瘤细胞凋亡抗体
同斑节对虾杆状病毒PCR检测试剂盒规格人抗内膜抗体(EMAb)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：25克

人抗组蛋白(H2A-H2B)-DNA抗体/抗二聚体-DNA抗体ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：100毫克

人抗组蛋白抗体(AHA)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：25克

人抗组织转谷氨酰酶抗体IgA(tTG-IgA)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：25克

人柯萨奇病毒IgG(CoxV-IgG)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：100毫升

人柯萨奇病毒IgM(CoxV-IgM)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：RT，避光10克

人颗粒酶A(Gzms-A)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：2000u

人颗粒酶B(Gzms-B)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：10KU