绵羊疱疹病毒通用PCR检测试剂盒规格

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

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实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
5′-CDP，2Na三(基)伍甲基环戊二烯基钌(II)六氟磷酸 96%α-己基肉桂 ≥95%,Kosher

5′-CTP，2Na聚乙烯 18-88 Mw ~130,000柳酸己酯 98%

5′-CTP，3Na聚乙烯 20-98 Mw ~125,000酸异戊酯 98%

5′-CTP，4Na聚乙烯 4-98 Mw ~27,000酸异戊酯 ≥98%, FCC

Thymine五氯 99%,用于植物细胞培养己酸异戊酯  98%

Uracil五氯标准溶液 0.1mg/ml2-异基-4-甲基噻唑 98%

Uridine五氯 分析标准品，99%异戊 98%

U 5′-P五氯标准溶液 100μg/ml,u=2%吲哚 99%

5′-UMP，2Na五氯标准溶液 10μg/ml,u=2%吲哚 ≥99%, FCC, Kosher

5′-UDP五氯 97%异丁酯 99%

5′-UDP,2Na硫酸奎尼丁 USP级异丁香酚(正+反) 97%

5′-UTP,3Na2-喹喔啉羧酸 97%乙酰基异丁香酚 ≥98%, FCC

5′-UTP,4Na罗丹明B 高纯级，≥95.0%（HPLC）乙酸异龙脑酯 90%

UDPGA树脂天青 90%乙位紫罗兰酮 97%

UDPG罗丹明6G AR异甲基紫罗兰酮70 60-70%

Guasine树脂天青 for cell culture,≥90% (HPLC)甲酸异戊酯  93%

盐酸恩诺沙星（标准品）PhosphoPlus® HSP27 (Ser82) Antibody DuetSATB1  核基质结合区结合蛋白1抗体

佐米曲普坦WIP1 (D4F7) Rabbit mAbSASS6  纺锤体组装异常蛋白6抗体

胸腺肽alpha 1IRF-3 (D6I4C) XP® Rabbit mAbSASH1  肿瘤抑制基因PEPE1抗体

替加氟IRF-3 (D6I4C) XP® Rabbit mAbSART3  T淋巴细胞识别的鳞状细胞癌SART3抗体

替加氟（标准品）SignalSilence® MDR1/ABCB1 siRNA IISART1  T淋巴细胞识别的鳞状细胞癌抗原抗体

阿昔莫司，阿西莫司PAI-1 (D9C4) Rabbit mAbSARS S-protein  抗表面S蛋白抗体

阿昔莫司，阿西莫司（标准品）MDH2 (D8Q5S) Rabbit mAbSARS putative orflab polyprotein  抗体

阿达帕林Phospho-cdc25C (Ser216) Blocking PeptideSARM1  SARM1蛋白抗体

阿达帕林(标准品)EWS AntibodySarcomeric Alpha Actinin/ACTN2  α横纹肌辅肌动蛋白/α-SCA抗体

阿德福韦NFI-C AntibodySAPK3/MAPK12  应激活化蛋白激酶3抗体（丝裂原活化蛋白激酶12）
绵羊疱疹病毒通用PCR检测试剂盒规格人巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：25克

人聚集蛋白(Agrin)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：500克

人卷曲蛋白8(FZD8)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：25毫克

人军团菌抗体IgA(LPAb-IgA)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：25克

人军团菌抗体IgG(LPAb-IgG)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：保存：-20℃100毫克

人军团菌抗体IgM(LPAb-IgM)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：25片

人军团菌抗原(LPAg)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：150米

人抗BB抗体(BB-Ab)ELISA试剂盒  *shēng huà shì jì  容量：RT25克