巴西诺卡菌PCR检测试剂盒价格上海联祖生物相关产品:PPI检测试剂盒背景低,灵敏度高,线性范围宽,重复性好
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产品名称 | 巴西诺卡菌PCR检测试剂盒价格 |
英文名称 | Nocardia brasiliensisPCR |
货号 | LZP7065 |
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。
Boc-D-valine小鼠肾动脉平滑肌细胞*培养基丁二酸 AR,99.5%
Z-L-Alanine小鼠肾小管上皮细胞*培养基丁二酸 GCS,≥99.5% (T)
Z-D-alanine小鼠肾小球内皮细胞*培养基丁二酸 CP,99.0%
Z-Gln-OH小鼠前列腺上皮细胞*培养基腐植酸 黄腐酸FA ≥90%
Z-Asn-OH小鼠肾上皮细胞*培养基己酸二乙氨基乙酯 分析标准品
CBZ-L-Phe小鼠膀胱成纤维细胞*培养基绒毛膜促性激素 ~5,000-7000 I.U. per mg
Z-D-Phe-OH小鼠肾足突细胞*培养基促性腺素 来源于绝经期妇女尿液 >200 I.U. per mg
Z-Glu-OH小鼠肾小管平滑肌细胞*培养基肝素钠 185 USP units/mg
CBZ-D-Glu小鼠肾成纤维细胞*培养基4-叔丁基苯甲酸 99%
Z-L-aspartic acid小鼠表皮角化细胞*培养基环基溴 99%
N-Cbz-D-aspartic Acid小鼠成纤维细胞*培养基环基溴 98%
CBZ-L-Arg小鼠软骨细胞*培养基对叔丁基苯甲酸甲酯 99%
Z-DL-phenylalanine小鼠破骨细胞*培养基对氨基苯乙酮 99%
N-Z-S-phenyl-L-cysteine小鼠皮肤肥大细胞*培养基4-羟基二苯甲酮 98%
CBZ-L-Gly小鼠前脂肪细胞*培养基2-巯基-1-甲基咪唑 98%
N-Cbz-Hydroxy-L-proline小鼠成骨细胞*培养基环己胺盐酸盐 电子级
甲氨蝶呤C-fos(i mmediate early gene, ieg) 即刻早期基因(是一种原癌基因)抗原SSTR1 生长抑素受体1抗体
甲氨蝶呤(标准品)C-jun/AP-1 (Oncoprotein C-jun:active protein 1) 原癌基因蛋白(活化蛋白1)(抗原)SSEA3 阶段特异性胚胎表面抗原-3抗体
尼美舒利cyclin D1 周期素D1(抗原)SSDD/Steroid sulfatase 类固硫酸酯酶抗体
硝酸咪康唑Beta-casein( Beta-casein) β-酪蛋白(抗原)SSBP2 抑癌基因SSDP2抗体
硝酸咪康唑(标准品)CCK8 (Cholecystokinin-8) 胆囊收缩素/缩胆囊素(八肽)SSB/La 干燥症SSB/La抗体
硫酸小诺霉素/硫酸小诺米星/硫酸沙加霉素CD3 epsilon peptide CD3 epsilon(抗原)SSA/52KDa Ro 核糖核蛋白抗原抗体
小诺霉素(标准品)CD4 CD4(抗原)SRXN1 硫氧还蛋白1抗体
MUG;4-甲基伞型酮-beta-D-葡糖苷酸CD4(Rabbit Anti-Human Mouse rat CD4 Palyclonal Anti-body) CD4抗原SRRM4 丝氨酸/精氨酸相关核基质蛋白4抗体
米诺地尔CD8 CD8抗原SRRM3 丝氨酸/精氨酸相关核基质蛋白3抗体
米诺地尔(标准品)CD20(抗原) CD20(抗原)SRRM2 丝氨酸/精氨酸相关核基质蛋白2抗体
巴西诺卡菌PCR检测试剂盒价格人端粒酶(TE)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:1公斤
人对氨基苯甲酸(PABA)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:RT25克
人对氧磷酶(PON)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:100克
人多巴(DA)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:500克
人多巴D1受体(D1R)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:500克
人多巴D2受体(D2R)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:2~8℃,避光1克
人多巴-β羟化酶(DBH)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:500克
人多巴脱羧酶(DDC)ELISA试剂盒 *shēng huà shì jì 容量:25克
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。